Chemiluminescence Immunoassay, CLIA ir ļoti jutīga imūntesta metode.
1. Princips
Ķīmiluminiscences imūntests apvieno imūnās atbildes specifiskumu un ķīmiskās luminiscences augsto jutību. Tās pamatprincips ir apvienot specifisko imūnreakciju starp antigēnu un antivielu ar hemiluminiscences reakciju. Precīzāk, antigēns pārbaudāmajā paraugā apvienojas ar specifisku antivielu, veidojot imūnkompleksu. Pēc tam, izmantojot virkni ķīmisku reakciju, imūnkomplekss rada hemiluminiscējošu signālu. Luminiscences intensitāte ir proporcionāla pārbaudāmā antigēna koncentrācijai, un pārbaudāmā antigēna saturu var kvantitatīvi analizēt, nosakot luminiscences intensitāti.
2. Galvenās sastāvdaļas
Antivielas: tostarp uztveršanas antivielas un noteikšanas antivielas. Satveršanas antiviela parasti tiek fiksēta uz cietās fāzes nesēja, lai uztvertu pārbaudāmo antigēnu. Noteikšanas antiviela tiek kombinēta ar hemiluminiscējošu marķieri, lai noteiktu antigēnu imūnkompleksā.
Cietās fāzes nesējs: piemēram, mikroplates, magnētiskās lodītes utt., ko izmanto, lai fiksētu uztveršanas antivielu, lai atvieglotu imūnreakciju un atdalīšanu un mazgāšanu.
Ķīmiluminiscējošais marķieris: parasti viela, kas ķīmiskā reakcijā var radīt luminiscējošu signālu, piemēram, luminols, akridīnija esteris utt. Marķieris apvienojas ar noteikšanas antivielu, lai pēc imūnreakcijas radītu hemiluminiscējošu signālu.
Atklāšanas sistēma: ietver tādas iekārtas kā luminiscences detektori, ko izmanto, lai noteiktu hemiluminiscences signālu intensitāti un pārvērstu tos nolasāmās vērtībās.
3. Funkcijas
Augsta jutība: var noteikt ļoti zemas testējamās vielas koncentrācijas, kas parasti ir par vairākām kārtām jutīgākas nekā tradicionālās imūnanalīzes metodes.
Plašs lineārais diapazons: Testējamās vielas saturu var precīzi izmērīt plašā koncentrācijas diapazonā bez vairākiem atšķaidījumiem.
Spēcīga specifika: pamatojoties uz antigēna un antivielu specifisko saistīšanos, tas ir ļoti selektīvs attiecībā uz konkrētām testa vielām.
Ātri: noteikšanas process ir salīdzinoši ātrs, un rezultātus parasti var iegūt īsākā laikā.
Augsta automatizācijas pakāpe: tas ir piemērots liela mēroga paraugu noteikšanai, un to var izmantot kopā ar automatizētiem instrumentiem, lai uzlabotu noteikšanas efektivitāti.
4. Pielietojuma jomas
Klīniskā diagnoze: to izmanto, lai noteiktu dažādus biomarķierus, piemēram, audzēju marķierus, hormonus, infekcijas slimību marķierus utt., Lai nodrošinātu svarīgu pamatu slimību diagnostikai, ārstēšanas uzraudzībai un prognozes novērtēšanai.
Zāļu izstrāde: to izmanto zāļu koncentrācijas uzraudzībai, efektivitātes novērtēšanai un zāļu metabolisma pētījumiem.
Pārtikas nekaitīguma pārbaude: kaitīgo vielu, pesticīdu atlieku, veterināro zāļu atlieku u.c. noteikšana pārtikā.
Vides monitorings: Piesārņojošo un toksisko vielu noteikšana vidē.